所属栏目：推荐论文发布时间：2011-02-25浏览量:107
副标题#e# [摘要]利用高效液相色谱仪测定食品中过氧化苯甲酰
[关键词]高效液相色谱过氧化苯甲酰回收率线性
一、前言
过氧化苯甲酰是一种氧化性漂白剂，对面粉具有显著增白和改善面团质结构的作用，同时又可全部分解产生原子态氧和对人体有害的物质苯甲酸。因此，我国《食品添加剂使用卫生标准》中规定，过氧化苯甲酰在小麦中最大用量为0.06g/kg。
目前，过氧化苯甲酰是依据GB/T18415-2001标准气相色谱方法测定的，样品处理复杂、耗材、耗时，而且过滤时出现吸附现象严重，造成回收率低，且检验周期比较长（至少15小时以上）。因此，我们反复试验，找到了一种新的液相色谱测定法，简单、易操作，避免层析现象回收率可达93%，线性比较好。既节省了耗材，又缩短了分析时间（只需5小时），大大提高了工作效率。
二、实验部分
1、范围
本文规定了以高效液相色谱法测定小麦种过氧化苯甲酰的方法。此法适用小麦分类。
2、方法原理
过氧化苯甲酰在酸性甲醇中被还原成苯甲酸，经提取后，在高效液相色谱（以下简称HPLC）仪器上分离，进行测定。
3、试剂：（以下试剂为分析纯和HPLC级试剂，水为三级水）
3.1甲醇2）冰乙酸3）0.02mol/L乙酸铵4）10%亚铁氰化钾5）22%硫酸锌
4、标准品制备
4.1苯甲酸标准储备液：准确称取0.1000g苯甲酸标准品于100mL容量瓶中，加水稀至100mL，此液为1.0mg/mL。
4.2苯甲酸标准工作液：取上述储备液25mL于250mL容量瓶中，加水稀至刻度，此液为100μg/mL，再分别取：0，20，40，60，80mL于5个100mL容量瓶中，用水稀至100mL此溶液浓度分别为：0mg/L，20mg/L，40mg/L，80mg/L。
5、仪器
5.1高效液相色谱（带紫外检测器）
5.2超声波振荡器
5.3食品粉碎器
5.4离心机
6、样品制备
准确称取5g样品于125mL磨口三角瓶中，准确加入25mL甲醇，0.5mL冰乙酸，立即盖好瓶盖，放入振荡器中4h，振荡取下静止，将洗液倒入离心管中离心2min，取下，用移液管吸取10mL于50mL容量瓶中，加20mL水，加5mL亚铁氰化钾，加5mL乙酸锌，用水稀释刻度，摇匀，过滤，待测。
7、液相色谱条件
7.1柱子：C18反向柱或类似分析柱
7.2流动相：甲醇：0.02mol/L乙酸铵：25：75（经滤0.45μm膜过滤）
7.3流速：1.0MI/MIN
7.4波长：230λm
7.5柱温箱：40℃
7.6进样量：20μL
7.7外标法
8、结果计算：
m标----标样中标样浓度
m样----样品称样量
A标----标样峰面积
A样-----样品峰面积
0.992----苯甲酸换算成过氧化苯甲酰的系数
9、允许差：
取双试验测定，
结果的算术平均值为测定结果，两次平均测定的相对偏差不大于15%。
三、精密度和准确度测定
精密度取两次，准确度取结果回收率，回收率平均值92.7%
序号样品中含量（mg）样品中加苯甲酸量（mg）实测总含量（mg）回收率（%）
10.3970.5630.93296
20.3970.5630.91592
30.3971.1261.444293
40.3971.1261.39890
四、线性相关测定
2mL----0.0023
4mL----0.0045
6mL----0.0068
8mL----0.0090
实测响应值
五、作者简介
史常春（出生于1976年12月），男，毕业于长江大学，工程师职称，现任荆州市产品质量监督检验所副所长，技术负责人，主持开展各项科技技术开发，具备丰富分析、检验、开发经验。
面粉标样分析报告
试验时间：2008-08-20，12：56：34实验者：杜汉莉
谱图文件：d:\浙大智达\N2000\样品\面粉20080820125634，org报告时间：2008-08-20,13:51:42
积分方法：面积外标法
使用仪器类型：液相色谱梯度方法：恒流检测器：紫外
仪器型号：Angle#p#副标题#e#nt1100波长（nm）:230
柱温（℃）：40柱型号：C-18
分析结果表
峰号峰名保留时间峰高峰面积含量
1苯甲酸5.30741927.410345876.5630.0050
总计41927.410345876.5630.0050
峰参数表
峰宽斜率漂移最小面积时间变参锁定时间停止时间样品重量
570.0000.00010000.0000.0003.5009.10350.0000
组分表
组分号峰名峰保留时间时间窗宽度因子1因子2内标物重量
1苯甲酸5.3070.2427.23E-0090.00E+0000.0000
面粉分析报告加标0.5ml
试验时间：2008-08-20,11:38:49实验者：杜汉莉
谱图文件：d\浙大智达\N2000\样品\面粉20080820113849.org报告时间：2008-08-20,14:49:37
积分方法：面积外标法
使用仪器类型：液相色谱梯度方式：恒流检测器：紫外
仪器型号：Anglent11-00柱温（℃）：40柱型号：C-18波长（nm）:230
分析结果表
峰号峰名保留时间峰高峰面积含量
13.4906350.41933559.1480.0000
23.890129263.383767207.6250.0000
3苯甲酸5.50779298.047515904.9380.1077
总计214911.8491316671.7110.1077
峰参数表
峰宽斜率漂移最小面积时间变参锁定时间停止时间样品重量
570.0000.00010000.0000.0003.50011.0073.4624
组分表
组分好峰名峰保留时间时间窗宽度因子1因子2内标物重量
1苯甲酸5.3150.2337.23E-00900E+0000.0000
面粉分析报告加标1ml
试验时间：2008-08-20,11:30:54实验者：杜汉莉
谱图文件:d:\浙大智达\N2000\样品\面粉20080820113054，org报告时间：2008-08-20,14:52:07
积分方法：面积外标法
使用仪器类型：液相色谱梯度方式：恒流检测器：紫外
仪器型号：Anglent1100波长（nm）:230
柱温（℃）：40柱型号：℃-18
分析结果表
峰号峰名保留时间峰高峰面积含量
13.890123048.094735552.0000.0000
2苯甲酸5.498119534.461773429.6250.2059
合计242582.5551508981.6250.2059
峰参数表
峰宽斜率漂移最小面积时间变参锁定时间停止时间样品重量
570.0000.00010000.0000.0003.5007.1982.7154
组分表
组分号峰名峰保留时间时间窗宽度因子1因子2内标物重量
1苯甲酸5.3150.2337.23E-0090.00E+0000.0000
面粉分析报告-4
试验时间：2008-08-20,11:51:40实验者：杜汉莉
谱图文件：d:\浙大智达\N2000\样品\面粉20080820115140.org报告时间：2008-08-20,14:45:27
积分方法：面积外标法
使用仪器类型：液相色谱梯度方式：恒流检测器：紫外
仪器型号：Anglent1100波长（nm）:230
柱温（℃）：40柱型号：℃-18
分析结果表
峰号峰名保留时间峰高峰面积含量
13.4906655.54834568.7500.0000
23.882147613.359875489.8750.0000
3苯甲酸5.50733697.992219664.9380.0448
合计187966.9001129723.5630.0448
峰参数表
峰宽斜率漂移最小面积时间变参锁定时间停止时间样品重量
570.0000.00010000.0000.0003.5008.8633.5417
组分表
组分号峰名峰保留时间时间窗宽度因子1因子2内标物重量
1苯甲酸5.3150.2337.23E-0090.00E+0000.0000